LEADER 05204nam 2200613Ia 450 001 9910876785903321 005 20200520144314.0 010 $a1-282-02183-4 010 $a9786612021831 010 $a3-527-62436-8 010 $a3-527-62437-6 035 $a(CKB)1000000000724940 035 $a(EBL)481437 035 $a(OCoLC)323537126 035 $a(SSID)ssj0000107972 035 $a(PQKBManifestationID)11129235 035 $a(PQKBTitleCode)TC0000107972 035 $a(PQKBWorkID)10015018 035 $a(PQKB)11072812 035 $a(MiAaPQ)EBC481437 035 $a(EXLCZ)991000000000724940 100 $a19970120d1997 uy 0 101 0 $ager 135 $aur|n|---||||| 181 $ctxt 182 $cc 183 $acr 200 00$aAutomatische genetische Analytik /$fGunter Mertes ... 210 $aWeinheim ;$aNew York $cWiley-VCH$dc1997 215 $a1 online resource (252 p.) 300 $aDescription based upon print version of record. 311 $a3-527-30076-7 320 $aIncludes bibliographical references and index. 327 $aAutomatische genetische Analytik; Copyright Page; Vorwort; Geleitwort; Inhalt; 1 Bedarf und Konzept einer integrierten automatischen DNA-Analyse; 1.1 Was hat die DNA-Analyse so popula?r gemacht?; 1.2 Methodische Quantensprunge machten die DNA,, reif"" fu?r die Routineanalyse; 1.3 Was bedeutet integrierte automatische genetische Analyse?; 1.3.1 Teilbereiche der molekularen DNA-Analyse; 1.3.2 Das Konzept der Integration; 2 Die DNA-Pra?paration fu?r die automatische DNA- Analyse; 2.1 Einfu?hrung; 2.2 Vektoren fu?r die DNA-Pra?paration; 2.3 DNA-Pra?paration durch PCR; 2.4 Methoden zur Plasmidpraparation 327 $a2.4.1 Alkalische Lyse2.4.2 Boiling-Methode; 2.4.3 Aufreinigung der Plasmid-DNA u?ber Sa?ulen; 2.5 ,,Solid-Phase""-DNA-Pra?paration; 2.6 Molekularbiologische Workstation; 2.7 Auswirkungen der DNA-Template-Qualita?t auf die automatische DNA-Sequenzierung; 2.8 Literatur; 3 Die PCR als Grundlage in der molekularen DNA- Analyse; 3.1 PCR - das Grundprinzip; 3.2 Automatisierung der PCR; 3.3 Optimierung von PCR-Reaktionen; 3.3.1 Reaktionsparameter; 3.3.2 Optimierungsstrategien; 3.4 Optimierung der Amplifikationspra?zision; 3.5 Spezielle PCR-Verfahren; 3.5.1 Touchdown-PCR; 3.5.2 Nested-PCR 327 $a3.5.3 Hot-Start-Technik3.6 Thermostabile Enzyme; 3.6.1 Taq-DNA-Polymerase; 3.6.2 rTth -DNA-Polymerase; 3.6.3 VentTM DNA-Polymerase; 3.6.4 Pfu-DNA-Polymerase; 3.6.5 UITmaTM DNA-Polymerase; 3.7 PCR und Kontaminationen; 3.8 Analyse der Amplifikationsprodukte; 3.8.1 Gelelektrophorese; 3.8.2 High Performance Liquid Chromatographie (HPLC); 3.8.3 Kapillar-Elektrophorese (CE); 3.8.4 TaqManTM-Assay zur Analyse von PCR-Produkten; 3.9 Literatur; 4 Die DNA-Synthese als grundlegendes Werkzeug in der molekularen DNA-Analyse; 4.1 Entwicklung der DNA-Synthese; 4.2 Chemische Grundlagen der DNA-Synthese 327 $a4.3 Chemischer Ablauf der DNA-Synthese4.3.1 Detritylierung; 4.3.2 Monomeraddition; 4.3.3 Capping; 4.3.4 Oxidation; 4.4 Automatisierung der DNA-Synthese; 4.5 Optimierung der DNA-Synthese; 4.6 Aufarbeitung von Oligonukleotiden; 4.6.1 Gelelektrophorese; 4.6.2 High Performance Liquid Chromatographie (HPLC); 4.6.3 Kapillar-Elektrophorese; 4.7 Mo?gliche Konsequenzen der Verwendung nichtgereinigter Oligonukleotide auf spa?tere Anwendungen; 4.8 Markierung von Oligonukleotiden; 4.8.1 Biotin-Markierung; 4.8.2 Phosphorylierung; 4.8.3 Fluoreszenzmarkierung; 4.9 Anwendungen von Oligonukleotiden 327 $a4.10 Literatur5 DNA-Sequenzanalyse; 5.1 Einleitung; 5.2 Sequenzier-Techniken; 5.2.1 Maxam-Gilbert-Sequenzierung; 5.2.2 Sequenzierung nach Sanger; 5.2.3 ,,Cycle-Sequenzierung""; 5.2.4 Multiplex-Sequenzierung; 5.3 Templates; 5.3.1 Phagen und Phagemide; 5.3.2 Plasmide und Cosmide; 5.3.3 PCR-Produkte; 5.3.4 Magnetic Beads; 5.4 Markierungs-Methoden; 5.4.1 Sequenzierung mit markierten Primern; 5.4.2 Sequenzierung mit markierten Desoxynukleotiden; 5.4.3 Sequenzierung mit markierten Didesoxynukleotiden (DyeTerminatoren); 5.4.4 Nachtra?gliche Sequenz-Markierung; 5.5 Der Weg zur vollsta?ndigen Sequenz 327 $a5.5.1 Geringer Aufwand fu?r die Probenvorbereitung 330 $aDie Bedeutung der genetischen Analyse hat in den letzten Jahren rapide zugenommen, und zwar nicht nur in Molekularbiologie und Medizin, sondern ganz besonders in ""molekularbiologisch fachfremden"" Gebieten, die sich ihrer zunehmend bedienen.Innerhalb der Rechtsmedizin und Kriminaltechnik z.B. ist die forensische DNA-Analytik mittlerweile zur Routinemethode geworden, auch in der Anthropologie und Pala?ontologie, in der Tier- und Pflanzenzu?chtung und der Lebensmittelproduktion steht diese Entwicklung unmittelbar bevor.Dieses Buch gibt einen zusammenfassenden U?berblick u?ber die methodisch 606 $aGenetics 606 $aDNA 615 0$aGenetics. 615 0$aDNA. 676 $a572.86 676 $a576.5 701 $aMertes$b G. nter$01761424 801 0$bMiAaPQ 801 1$bMiAaPQ 801 2$bMiAaPQ 906 $aBOOK 912 $a9910876785903321 996 $aAutomatische genetische Analytik$94200859 997 $aUNINA