Elektrophorese leicht gemacht : ein praxisbuch für Anwender / / Reiner Westermeier

• Record Nr.: UNINA9910136956003321
• Autore: Westermeier Reiner
• Pubbl/distr/stampa: Weinheim, Germany : , : Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, , 2016; ©2016
• ISBN: 3-527-69514-1; 3-527-80849-3; 3-527-69513-3
• Edizione: [2nd ed.]
• Descrizione fisica: 1 online resource (477 p.)
• Disciplina: 543.0871
• Soggetti: Electrophoresis; Electronic books.
• Lingua di pubblicazione: Tedesco
• Formato: Materiale a stampa
• Livello bibliografico: Monografia
• Note generali: Description based upon print version of record.
• Nota di bibliografia: Includes bibliographical references at the end of each chapters and index.
• Nota di contenuto: Cover; Titelseite; Impressum; Inhaltsverzeichnis; Geleitwort; Vorwort; Vorwort zur ersten Auflage; Abkürzungen; Teil I Grundlagen; 1 Elektrophorese; 1.1 Allgemeines; 1.1.1 Elektrophoresen in freier Lösung; 1.1.2 Elektrophoresen in stabilisierenden Medien; 1.1.3 Gelelektrophorese; 1.1.4 Stromversorger; 1.1.5 Trennkammern; 1.2 Elektrophoresen in nicht restriktiven Gelen; 1.2.1 Agarosegelelektrophorese; 1.2.2 Polyacrylamidgelelektrophorese von niedermolekularen Substanzen; 1.3 Elektrophorese in restriktiven Gelen; 1.3.1 Der Ferguson-Plot; 1.3.2 Agarosegelelektrophorese; 1.3.3 Polyacrylamidgelelektrophorese von Nukleinsäuren1.3.4 Polyacrylamidgelelektrophorese von Proteinen; Literatur; 2 Isotachophorese; 2.1 Wanderung mit gleicher Geschwindigkeit; 2.2 Trennung der Substanzen in der Form einer Kette ion train; 2.3 Zonenschärfungseffekt; 2.4 Konzentrationsregulierungseffekt; Literatur; 3 Isoelektrische Fokussierung; 3.1 Prinzip; 3.2 Gele für die IEF; 3.2.1 Polyacrylamidgele; 3.2.2 Agarosegele; 3.3 Temperatur; 3.4 Kontrolle des pH-Gradienten; 3.5 Arten von pH-Gradienten; 3.5.1 Freie Trägerampholyten; 3.5.2 Immobilisierte pH-Gradienten; 3.6 Präparative Isoelektrische Fokussierung3.7 Titrationskurvenanalyse; Literatur; 4 Hochauflösende Zweidimensional-Elektrophorese; 4.1 IEF in IPG-Streifen; 4.1.1 Streifengeometrie; 4.1.2 pH-Gradienten; 4.1.3 Einfluss von Salzen; 4.1.4 Basische pH-Gradienten; 4.1.5 Rehydratisieren von IPG-Streifen; 4.1.6 Probenaufgabe; 4.1.7 IEF-Bedingungen; 4.1.8 Instrumentierung; 4.2 SDS-PAGE; 4.2.1 Äquilibrieren der IPG-Streifen; 4.2.2 Technische Konzepte für die zweite Dimension (SDS-PAGE); 4.2.3 Geltypen; 4.2.4 Gelherstellung; 4.2.5 Durchführung der SDS-Elektrophorese; 4.3 Proteomik; Literatur; 5 Proteinprobenvorbereitung5.1 Proteinquantifizierungsmethoden; 5.2 Vorbereitung von nativen Proben; 5.3 Proben für die SDS-Elektrophorese; 5.3.1 SDS-Behandlung; 5.3.2 Aufreinigung und Proteinanreicherung; 5.4 Proben für die hochauflösende 2-D-PAGE; 5.4.1 Waschen von Zellen; 5.4.2 Zellaufschluss; 5.4.3 Probennahme und -aufbewahrung; 5.4.4 Inaktivierung von Proteasen; 5.4.5 Inaktivierung von Phosphatasen; 5.4.6 Alkalische Bedingungen; 5.4.7 Entfernung von störenden Substanzen; 5.4.8 Vorfraktionierung; 5.4.9 Spezialfall: Pflanzenproteine; Literatur; 6 Proteindetektion; 6.1 Fixierung; 6.1.1 IEF-Gele6.1.2 Agarosegele; 6.1.3 SDS-Polyacrylamidgele; 6.2 Färbungen nach der Elektrophorese; 6.2.1 Organische Farbstoffe; 6.2.2 Silberfärbung; 6.2.3 Negativfärbung; 6.2.4 Fluoreszenzfärbung; 6.2.5 Spezifische Detektion; 6.2.6 Visualisierung ohne Färbung; 6.3 Proteinmarkierung; 6.3.1 Proteinmarkierung mit Fluorophoren; 6.3.2 Radioaktive Markierung von lebenden Zellen; 6.4 Differenzgelelektrophorese (DIGE); 6.4.1 Minimal-Lysinmarkierung; 6.4.2 Sättigung-Cysteinmarkierung; 6.4.3 Der interne Standard; 6.4.4 Planung eines Experiments; 6.4.5 Die wichtigsten Vorteile von 2-D-DIGE; 6.4.6 Vergleichende Fluoreszenzgelelektrophorese